Q: 應(yīng)該如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損? A:  建議 血清應(yīng)保存在-10℃及以下。若一次無(wú)法用完一瓶，無(wú)菌分裝血 清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。解凍時(shí)，建議將血清從冷 凍室先移至2-8℃冰箱解凍，再放置于室溫進(jìn)行解凍。請(qǐng)注 意，解凍過(guò)程中需要經(jīng)常搖晃混合。嚴(yán)禁將FBS 在37℃長(zhǎng)時(shí)間孵 育解凍。

Q: 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長(zhǎng)期保存嗎? A: 一旦 您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在2周內(nèi)使用它。

Q:  如果我的FBS到達(dá)時(shí)已經(jīng)部分解凍，還能使用嗎? A:  所有的 依科賽生物ExCell Bio血清都在冰凍狀態(tài)下由干冰運(yùn)輸，因此您  收到時(shí)應(yīng)該仍是冰凍狀態(tài)。如果只是部分解凍， FBS仍然可以使 用，但是建議先將FBS在冰箱中充分解凍，之后溫和的搖晃搖勻，

再移至-10℃及以下進(jìn)行儲(chǔ)存。

Q: 不同批次血清顏色為什么有差異? A:  血清中含有微量的血 紅蛋白，與采集血液過(guò)程中血細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān)，只要血紅蛋 白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無(wú)關(guān)，不影

響細(xì)胞培養(yǎng)。中國(guó)藥典規(guī)定血紅蛋白含量≤200mg/L。

Q:  熱滅活是必須的嗎?A:  實(shí)驗(yàn)顯示，熱滅活對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞 而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促 進(jìn)，或全沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓?/span> 質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱滅活的血清，會(huì)增 加沉淀產(chǎn)生的概率，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小 黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過(guò)程中 局部溫度過(guò)高，搖晃不均勻，滅活時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，都會(huì)造成血清品質(zhì) 下降。若非必須，可以不需要做熱滅活這一步。不但節(jié)省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量!

 Q: 血清使用前是否有必要熱滅活，如何熱滅活? A:  請(qǐng)先確認(rèn) 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方案是否需要對(duì)血清進(jìn)行熱滅活。 一般不建議熱滅 活，熱滅活處理會(huì)損失血清中部分營(yíng)養(yǎng)成分，并且容易發(fā)生蛋白 質(zhì)聚集沉淀；少數(shù)對(duì)補(bǔ)體敏感的實(shí)驗(yàn)需要(如某些免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，

腺病毒包裝，某些PS培養(yǎng)等),可酌情使用熱滅活血清。熱滅活方法：血清全解凍充分搖勻后置于56°水浴中30分鐘

Q:  細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理? A:  一旦您在細(xì) 胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否 渾濁，然后在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如 果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變 渾濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么，

黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：①細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老，破碎的 細(xì)胞殘??；②配制培養(yǎng)基的pH 值偏高，不宜細(xì)胞生長(zhǎng)；③培養(yǎng) 原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除；④血清等級(jí)不足以維持細(xì)胞良好的生長(zhǎng)。

Q:FBS 中含有的絮狀物是什么東西? A:FBS  中的絮狀物可能由 很多種原因造成，其中最常見(jiàn)的沉淀主要成分是纖維蛋白和脂蛋 白，不會(huì)影響血清品質(zhì)，沉淀若需去除，視沉淀大小500-1000×g,離心5-10min去除，也可不做處理。

Q: 為什么要使用正規(guī)進(jìn)口的血清? A:① 有的血清缺乏檢驗(yàn)檢 疫監(jiān)管，冷鏈運(yùn)輸無(wú)法保障，嚴(yán)重影響血清批內(nèi)和批間穩(wěn)定性， 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果不可控；②正規(guī)的血清來(lái)源于中華人民共和國(guó)海關(guān) 總署允許進(jìn)口的非疫區(qū)國(guó)家，防止未經(jīng)檢疫的血液制品中可能攜帶傳染性物質(zhì)， 一旦流入境內(nèi)，可能會(huì)對(duì)試者和研究人員的生命健康造成威脅。