凱氏定氮法是測(cè)定某些有機(jī)化合物中三陰性態(tài)氮的分析方法。該方法由丹麥化學(xué)家Johan Kjeldahl于1883年開(kāi)發(fā)，廣泛用于食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)是由含氮氨基酸連接在一起組成的大分子。當(dāng)用于蛋白質(zhì)測(cè)定時(shí)，通過(guò)使用適當(dāng)?shù)臄?shù)字因子將測(cè)量的氮百分比轉(zhuǎn)換為當(dāng)量蛋白質(zhì)含量。對(duì)于肉類樣品，該系數(shù)為 6.25，因?yàn)槿忸惖鞍踪|(zhì)大約含有 16% 的氮。凱氏定氮法不直接檢測(cè)NN和NO鍵（例如疊氮化物、硝酸鹽、亞硝酸鹽、硝基等）。含有這些基團(tuán)的樣品在凱氏定氮分析之前必須進(jìn)行預(yù)處理或置于還原條件下。當(dāng)樣品中的有機(jī)物質(zhì)被沸騰的濃硫酸消化破壞時(shí)，樣品中的氨基氮轉(zhuǎn)化為硫酸氫銨。添加硫酸鉀以提高混合物的沸點(diǎn)，從而加速分解。必須根據(jù)樣品中存在的有機(jī)物質(zhì)的量來(lái)控制硫酸和硫酸鉀的用量，以確保維持 370 - 400°C 的適當(dāng)消解溫度范圍。溫度過(guò)低可能會(huì)導(dǎo)致消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)和/或消化不全，而硫酸鉀與硫酸的比例過(guò)高可能會(huì)使溫度升高到 400°C 以上，導(dǎo)致氮熱解損失和結(jié)果較低。還添加金屬催化劑以加速消化。在過(guò)去，汞是用于此目的的催化劑，但出于安全和環(huán)境原因，現(xiàn)在更常用銅和硒催化劑。

樣品消化完成后，將過(guò)量的*添加到消化混合物中以中和剩余的硫酸并釋放含氮分子分解時(shí)形成的氨。然后將氨蒸餾成過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸，并用標(biāo)準(zhǔn)堿反滴定過(guò)量的酸。作為替代方案，可以將氨蒸餾到硼酸溶液中，然后可以通過(guò)用標(biāo)準(zhǔn)酸直接滴定來(lái)測(cè)定氨。氨也可以通過(guò)比色法（例如，通過(guò)與酚鹽離子反應(yīng)）或通過(guò)使用氨選擇性電極來(lái)測(cè)定。在這些情況下，使用標(biāo)準(zhǔn)無(wú)機(jī)酸作為氨吸收劑。如果使用汞或汞鹽作為催化劑，硫代硫酸鹽或硫化物與*一起添加以分解任何汞-銨復(fù)合物，從而釋放出氨并沉淀汞化合物，這可能會(huì)干擾氨的蒸餾。將鋅粒、浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)*的反滴定。從而釋放氨并沉淀汞化合物，汞化合物可能干擾氨的蒸餾。將鋅粒、浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除了氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑也可用于使用標(biāo)準(zhǔn)*的反滴定。從而釋放氨并沉淀汞化合物，汞化合物可能干擾氨的蒸餾。將鋅粒、浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除了氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑也可用于使用標(biāo)準(zhǔn)*的反滴定。將浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑也可用于使用標(biāo)準(zhǔn)*的反滴定。將浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)*的反滴定。直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)*的反滴定。直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)*的反滴定。

所涉及的反應(yīng)可總結(jié)如下：

RICCA CHEMICAL COMPANY 擁有凱氏定氮分析所需的所有吸收劑、中和劑、滴定劑和指示劑，以及酚鹽比色測(cè)定或氨選擇電極法所需的試劑。