乙醇酸氧化酶測(cè)試盒

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.1）是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶，也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，對(duì)研究光呼吸代謝過(guò)程及其調(diào)控具有重要意義。

測(cè)定原理

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙，在324nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。

試劑組成和配制

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存，臨用前加5mL雙蒸水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

試劑三：液體2mL×1支，4℃保存。

酶液提取

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g， 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

測(cè)定操作表

酶活性計(jì)算公式

a．用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

GO活性（nmol/min /mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 392×△A÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：每克組織每分鐘氧化1 nmol乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

GO活性（nmol/min /g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T= 392×△A÷W

ε：乙醛酸苯腙毫摩爾消光系數(shù)：17L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.01mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3min

b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1．按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

GO活性（nmol/min /mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 784×△A÷Cpr

2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：每克組織每分鐘氧化1nmol乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

GO活性（nmol/min /g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T= 784×△A÷W

ε：乙醛酸苯腙毫摩爾消光系數(shù)：17L/mmol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.01mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3min

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷(xiāo)代理。

2. 國(guó)外試劑的訂購(gòu)?？商峁W美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購(gòu)方案。

3. 提供加急物流處理，進(jìn)口貨物，最快交期1-2周。

4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質(zhì)量保證，所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式，為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開(kāi)發(fā)需求。公司整合國(guó)際與國(guó)內(nèi)資源，加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè)，提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率，為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

7. 公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運(yùn)作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

乙醇酸氧化酶測(cè)試盒