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聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction,PCR）是分子生物學(xué)中基礎(chǔ)且廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一，用于特異性擴增目標(biāo)DNA片段。盡管PCR儀和試劑是核心要素，但實驗的順利進行同樣高度依賴一系列專用耗材。這些pcr耗材不僅影響反應(yīng)效率和特異性，還直接關(guān)系到實驗的重復(fù)性...
亞磷酰胺，也稱為amidite，是一種用于合成寡核苷酸的化合物，寡核苷酸是短鏈核苷酸。它們由連接到亞磷酰胺基團的核苷堿基（腺嘌呤、鳥嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶或尿嘧啶）組成，亞磷酰胺基團能夠在合成過程中與不斷增長的核苷酸鏈形成共價鍵合。寡核苷酸合成中的亞磷酰胺亞磷酰胺主要用于構(gòu)建寡核苷酸序列的過程，該過程分為多個步驟，通常為三步或四步。每個步驟都涉及特定的反應(yīng)和純化步驟，以將單個核苷酸添加到不斷增長的寡核苷酸鏈中并組裝所需的更長序列。在合成過程中，亞酰胺被激活并附著在固體載體上，...
可電離脂質(zhì)是一類脂質(zhì)分子，在生理pH值下保持中性，但在低pH值下質(zhì)子化，使它們帶正電荷，ALC-0315（圖1）是一個例子，其胺位點可在低pH值下質(zhì)子化。圖1：ALC-0315的結(jié)構(gòu)可電離脂質(zhì)是可電離脂質(zhì)納米顆粒(LNP)的關(guān)鍵成分之一，已廣泛用于RNA治療藥物的全身遞送。LNPs中的其他脂質(zhì)分子包括輔助脂質(zhì)、膽固醇、PEG脂質(zhì)等。LNP制劑中常見的可電離脂質(zhì)材料包括C12-200、cKK-E12和DLin-MC3-DMA。這些LNP在0.002mgsiRNA/kg的劑量水平...
陽離子脂質(zhì)（lipoplexes）和聚合物（polyplexes）是常用的非病毒基因遞送系統(tǒng)。Tee技術(shù)（觸發(fā)內(nèi)體逃逸）結(jié)合并利用了兩個實體的特性，以實現(xiàn)極其有效的核酸遞送到細胞中。事實上，新一代脂多胺含有親脂部分（例如脂質(zhì)）和帶電多胺部分（例如陽離子聚合物）。這些部分協(xié)同作用，確保緊密的核酸壓縮和保護以及內(nèi)體膜非常有效的去穩(wěn)定，從而允許在胞質(zhì)溶膠中釋放大量核酸并攝取DNA核。特別關(guān)注可生物降解實體的合成。這樣，轉(zhuǎn)染試劑不會干擾細胞機制，每次實驗都能保持高細胞活力，并避免任何...
Magnetofection™是一種簡單且高效的方法轉(zhuǎn)染方法可轉(zhuǎn)染原代細胞和難轉(zhuǎn)染細胞。Magnetofection™的原理是將核酸、轉(zhuǎn)染試劑或病毒與特定的磁性納米粒子結(jié)合起來。然后將所得的分子復(fù)合物濃縮并運輸?shù)接蛇m當(dāng)磁場支持的細胞中。通過這種方式，利用施加在基因載體上的磁力可以將所施加的全部載體劑量非?？焖俚丶性诩毎?，從而使100%的細胞與有效的載體劑量接觸，并促進細胞攝取。它是如何工作的？磁性納米顆粒由氧化鐵制成，可生物降解，并根據(jù)應(yīng)用涂有特定...
發(fā)展后脂轉(zhuǎn)染（基于脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染方法）和磁轉(zhuǎn)染（基于磁性納米顆粒的轉(zhuǎn)染方法），OZBiosciences通過設(shè)計和合成新型陽離子羥基化雙親多嵌段聚合物(CHAMP)改變了Polyfection，該聚合物具有生物相容性、可裂解、pH響應(yīng)性和雙功能。我們基于CHAMP技術(shù)創(chuàng)建了一種全新的轉(zhuǎn)染劑，以區(qū)別于通常使用經(jīng)典轉(zhuǎn)染方法進行的轉(zhuǎn)染劑。這種新型雙功能共聚物具有生物相容性、可電離性和pH敏感性。它由三個部分組成，結(jié)合并引入了三個協(xié)同概念：由于其電荷、pH敏感和疏水特性，“穿過膜屏障”的...
脂轉(zhuǎn)染是一種基于脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染該技術(shù)屬于生化方法，還包括聚合物、DEAE葡聚糖和磷酸鈣。脂轉(zhuǎn)染原理是將核酸與陽離子脂質(zhì)制劑結(jié)合起來。由此產(chǎn)生的分子復(fù)合物（稱為脂質(zhì)復(fù)合物）隨后被細胞吸收。脂轉(zhuǎn)染的主要優(yōu)點是效率高、能夠在多種細胞類型中轉(zhuǎn)染所有類型的核酸、易于使用、重現(xiàn)性好和低毒性。此外，該方法適用于所有轉(zhuǎn)染應(yīng)用（瞬時轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染、共轉(zhuǎn)染、反向轉(zhuǎn)染、順序轉(zhuǎn)染或多重轉(zhuǎn)染……）、高通量篩選測定，并且在一些體內(nèi)模型中也顯示出良好的效率。它是如何工作的？用于脂轉(zhuǎn)染的脂質(zhì)試劑通常由合成的陽離...
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